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這導致了相應的從對食品微生物的特定分類羣或種羣的調查轉向更廣泛的基於羣落的分析。 這些方法基於核酸、蛋白質和/或代謝物的提取,無需培養即可檢測和表徵環境中的微生物。 由於微生物的發生和相互作用會影響食品的質量和安全,因此對這些過程的深入瞭解有助於對不良食品安全事件進行早期干預,確保最佳食品質量,並確定理想或不理想微生物的來源。 但最大的限制之一是,這些方法往往只能檢測樣本中存在的一小部分微生物,因爲它們依賴於單個微生物在培養基上的分離和生長,其代謝和生理需求可以在體外複製。 宏力動物醫院2025 這不僅忽略了部分可存活但不可培養的微生物,而且也沒有考慮樣本中存在的細菌羣落之間的關係。

  • 這種方法還可用於觀察食品中的原位基因表達,收集目前在食品生態系統中表達的可能與食品發酵和/或腐敗相關的代謝活動的信息。
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  • 尤其在多路複用時,引物設計至關重要,因爲引物組需要相似的退火溫度才能成功進行檢測。
  • 此外,隨着測序技術的使用,先進的計算能力和生物信息學技能對於它們的使用是必要的,這在考慮應用這些方法時增加了挑戰。
  • 這可能是有益的,也可能是有害的,例如,在發酵食品生產中具有明顯的有益影響。
  • 發酵食品微生物可以自發引入(從原料或生產或加工環境)或作爲發酵劑接種,隨着時間的推移,可以產生酶、揮發性化合物和抗菌分子,如有機酸、脂肪酸、過氧化氫、雙乙酰和細菌素,有助於減緩或防止腐敗和病原微生物的生長。

這種方法揭示了羣落中最活躍的微生物,同時也使人們能夠更深入地瞭解複雜食物微生物羣落或與食物相關環境中的微生物羣落是如何相互作用的。 這種方法還可用於觀察食品中的原位基因表達,收集目前在食品生態系統中表達的可能與食品發酵和/或腐敗相關的代謝活動的信息。 宏轉錄組學的另一個優勢是能夠檢測基於RNA的病毒,包括食源性病原體,如諾如病毒。 在過去幾十年中,AMR已被確定爲嚴重的公共衛生威脅,因此,發佈了更多用於從測序數據中檢測AMR遺傳決定因素的工具。 雖然通常使用培養分離株的全基因組測序,但宏基因組測序在監測AMR方面顯示出巨大潛力,因爲宏基因組測序在量化豬羣耐藥性方面優於基於培養的方法。

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相反,利用不同的元組學方法在各種乳製品、肉類和蔬菜加工設施的表面發現了腐敗或病原微生物。 例如,在奶酪和鮭魚加工廠的下水道生物膜中發現了假單胞菌(Pseudomonas spp.),在牛奶和肉類加工廠的表面發現了葡萄球菌和耶爾森氏菌等病原體。 事實上,由宏遺傳學確定的生物膜中微生物羣落與環境因素的相關性已經被用來追蹤隨時間推移的持久性,表明細菌羣落在肉類和魚類加工廠中具有位置特異性。 此外,可以通過元組學方法評估病原體與其他微生物的微生物共存以及複雜生態系統中的微生物相互作用,這可以確定有利於或阻止食源性病原體生長或生存的模式。

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類似地,基於RNA的16S rRNA測序表明,目前使用臭氧的清潔方法是有效的,並導致肉類加工廠中潛在活性微生物羣發生變化。 相比之下,由宏遺傳學確定的鮭魚加工廠的衛生設施被發現不達標,因爲假單胞菌在傳送帶上的生物膜中持續存在。 最後,已發現基於測序的元組學方法是識別加工鏈中微生物的有效工具,常規實施有助於揭示影響微生物種羣動態的因素。 迄今爲止進行的大量研究表明,利用元組學方法追蹤食物鏈中的微生物羣落具有很大的潛力。 元組學技術已被用於表徵肉類、奶製品和酒精飲料等食品加工涉及的幾種環境。 利用元組學方法進行此類研究的一個關鍵觀察結果是,在加工環境中存在一種持續存在的常駐微生物羣,病有可能影響最終食品的質量和安全。

  • 我想家中有養貓咪的飼主每一天最放鬆的時刻就是回到家中,尋求家裡貓咪給抱抱和摸摸,感覺就能去除壓力及困擾了,撫摸家中的貓咪式釋放壓力的一種…..
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  • 本文簡要介紹了微生物對食品質量安全的貢獻以及微生物鑑定的傳統方法。

基本概念是,與傳統食品相關的微生物羣與食品的地理來源和生產方式密切相關,因爲微生物是原材料和環境的典型代表。 儘管取得了一些成功,但將微生物組作爲確定食物來源的手段仍存在挑戰。 這包括需要有一個包含預期食品微生物組組分的數據庫,以及由於儲存或加工條件而導致的微生物組潛在變化。 與其他元組學應用類似,對參考數據庫完整性和食品基質認證的準確性的依賴對於避免不準確的結論非常重要。 Haiminen等人發現DNA和RNA鳥槍法測序都是用於食品認證和污染物檢測的準確非靶向方法,Kamilari等人用互補代謝組學對PDO奶酪進行了表徵,以確定產品來源的區分因素。 宏力動物醫院2025 (1)mNGS檢測某些苛養/難檢/低載量微生物能力還需要提升:mNGS通過對樣本中所有核酸進行測序,從而實現廣泛無偏的病原微生物檢測。

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目前街道上除了流浪狗外還有很多流浪貓,貓咪在路邊流浪的場景在臺灣隨處可見,且有很多善心人士憂心貓貓肚子餓,所以有時會餵食街貓。

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微生物羣落存在於整個食物鏈中,瞭解其動態以及促進或阻礙其生長的條件將有助於食品安全和質量目的。 使用元組學方法的研究研究了食品、食品相關環境和食品加工步驟,如圖2所示,下文將詳細闡述。 目前,mNGS主要應用於懷疑感染的急危重症、常規檢測陰性但懷疑感染的等疑難雜症的患者。 未來基於傳統檢測、tNGS和mNGS的小、中、大覆蓋範圍的病原檢測方法將更有效、更精準的服務於臨牀的精準診療。 1.tNGS靶向富集策略:tNGS的兩種主要靶向富集方法中,雜交捕獲靶向測序主要是利用探針雜交富集目標片段,適用於基因組目標區域的全面檢測。 目前應用的主要是液相雜交捕獲測序,即基於鹼基互補配對原理,設計合成核酸探針,對DNA文庫進行基於液相環境的目標區域雜交富集,並進行測序。

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這有時是一個重大限制,特別是在食品安全方面,僅在屬水平上進行識別可能不足以瞭解存在的可能導致食品鏈上食品安全或質量問題的實際物種。 對靈敏度和特定檢測的需求以及其他挑戰證明,這些基於羣落的方法目前不適用於監管合規級別,但隨着進一步發展,這將成爲未來的標準。 5.2.2 食品相關環境 從農場到加工設施,食品相關環境一再被發現會對最終產品的微生物羣產生積極或消極的影響。 利用元組學方法監測食品加工過程中食品微生物羣落的變化,有助於理解加工過程對食品質量和安全的影響。 一種方法涉及對整個食品加工鏈進行分析,從整個過程開始到結束採集樣本,並使用元組學方法來追蹤微生物羣落動態的變化,這有助於制定緩解措施。

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然後直接測序並與參考數據庫進行比對,以確定整個微生物羣落的分類學組成。 16S rRNA基因是細菌鑑定中最常用的基因,普遍存在於細菌中,該基因包含9個高變區,其中部分或全部可通過擴增和測序靶向鑑定相應的細菌分類。 類似的方法可以通過靶向18S或23S 宏力動物醫院 rRNA基因或rRNA操縱子的內轉錄間隔區應用於真菌。

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TNGS技術是基於NGS的靶向富集(Target enrichment)的測序技術。 宏力動物醫院 靶向富集是tNGS技術的關鍵環節,通過對目標基因組區域(regions of interest ,ROI)進行富集,確保ROI區域有足夠的測序深度和覆蓋度,進而成功地識別目標病原體。 目前國內外策略主要分爲兩種:基於超多重PCR擴增的tNGS和基於雜交捕獲的tNGS 。 畢業於國立嘉義大學獸醫學系,就學期間開始在不同的小動物醫院實習,並先後進入中興大學附設動物醫院、嘉義大學附設動物醫院實習,以累積足夠的臨牀經驗。 106年加入宏力動物醫院團隊,接受將近兩年的住院醫師完整訓練,包括麻醉、急診醫療、一般內科等。

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對於宿主核酸的去除方法,目前還沒有比較有效可行的方法和標準。 這包括食物來源/衍生的農作物和動物,以及土壤、水、耕作系統、害蟲和氣候條件等環境因素。 元組學方法發現,牧場系統、動物圈舍、空氣中的灰塵、灌溉水等因素可以影響食品的微生物羣多樣性和組成。 除了多樣性和組成,用於表徵耐藥性的元組學方法表明,農場環境是AMR細菌和基因的潛在載體(這些細菌和基因源自灰塵和動物糞便),有助於AMR傳播和工人暴露。 將動物糞便用作肥料(糞肥/廢水)也會導致AMR細菌和基因在環境中傳播,進而影響在土地上種植的作物或飼養的動物的微生物羣。 季節性影響在某些產品中很明顯,如牛奶和牛肉,在這些產品中,宏遺傳學和宏基因組學的使用揭示了最終產品微生物羣的季節性變化。

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(2)寬譜的微生物覆蓋導致mNGS結果解讀是一項巨大的挑戰:mNGS生信分析過程中不僅要構建包含所有病原微生物的數據庫,還需要構建相關的數據庫用於過濾。 考慮到不同微生物的致病性和致病條件,mNGS需要設定個性化的報出閾值。 如結核分枝桿菌、鼠疫耶爾森菌及流行性出血熱病毒等的高致病但低病原載量的病原體專家共識建議,在排除污染的前提下,即使檢出1條序列也應視爲陽性。 即便如此,mNGS報出的微生物數量也在5-20個,這使得mNGS的臨牀解讀具有巨大的挑戰,需要大量的臨牀、病原微生物診斷和專業經驗,需要考慮臨牀整體情況,這通常需要一個專業的多學科團隊來完成。 宏力動物醫院 分析方法的進一步發展要克服元組學方法的挑戰,例如宿主DNA損耗和區分微生物羣落中活微生物的能力,這樣元組學方法將在食品加工鏈中的微生物表徵方面得到更廣泛的應用。 (2)mNGS檢測經抗菌藥物治療患者,混合感染患者具有優勢:經驗性抗菌藥物在急性重症感染患者的治療中仍比較普遍,但是帶來的問題是可能會影響傳統方法鑑定病原體的敏感性。

處理可能是污染或微生物轉移的潛在來源,微生物可以不知不覺地從表面轉移到食品中。 Moraxella spp.是一種主要的肉類腐敗菌,在員工的手套上發現了這種細菌,並通過全長16S rRNA基因測序鑑定爲整個豬肉加工廠的潛在污染源。 同樣,在高通量測序揭示了屍體中腐敗相關細菌的來源及其在環境中的持久性之後,處理被確定爲牛肉產品中腐敗菌增殖的催化劑。 然而,隨着分子技術和高通量測序技術的發展,非培養技術越來越多地應用於食品微生物組分析。

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此外,用於分析生成數據的生物信息學專業知識目前對於從測序數據中得出準確和正確的解釋至關重要。 中興大學獸醫學系畢業後即通過國家考試,並於中興大學獸醫教學醫院擔任一年的實習醫師,而後通過甄選繼續於麻醉暨重症加護科學習專業知識與技術。 在王鹹棋老師三年的指導中,完成住院醫師訓練,即至宏力動物醫院提供高品質的麻醉服務。

對於雜交捕獲測序,會涉及到探針序列設計、目標病原體的選擇、精細化數據庫的構建等多個技術開發難點。 基於測序的方法包括宏遺傳學、宏基因組學和宏轉錄組學,其他基於羣落的方法包括宏蛋白質組學和宏代謝組學,這些方法目前被用於人類、環境和食品微生物組的研究。 這反映在許多LAB對發酵食品環境的自然適應上,但多年來的研究已經對其進行了補充,以更好地理解和提高其對產品安全、感官、營養和健康特性的貢獻。

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